روش انجام تست MTT:

آزمون MTT یک روش آزمایشی در شرایط آزمایشگاهی است که به طور گسترده ای مورد استفاده قرار می گیرد و زنده ماندن سلول ها را در پاسخ به محرک های مختلف، از جمله مواد سمی، مواد شیمیایی، اندازه گیری می کند. عوامل بیولوژیکی این آزمایش بر اساس توانایی سلول های زنده برای کاهش نمک تترازولیوم زرد، MTT، به محصول نامحلول آبی فرمازان آن است که به راحتی می توان مقدار آن را تعیین کرد.

آزمایش MTT معمولاً در تحقیقات زیست شناسی سلولی و سم شناسی برای موارد زیر استفاده می شود:

1. ارزیابی زنده ماندن سلول: این آزمایش روشی سریع و ساده برای ارزیابی زنده ماندن سلول ها در پاسخ به درمان های مختلف، مانند قرار گرفتن در معرض مواد شیمیایی، تابش، یا عفونت ارائه می دهد.
2. تعیین سمیت سلولی: این آزمایش را می توان برای شناسایی غلظت یک ماده سمی مورد نیاز برای القای 50 درصد مرگ سلولی (LC50) یا برای تعیین درجه سمیت سلولی ناشی از مواد مختلف استفاده کرد.
3. غربال فعالیت ضد میکروبی: تست MTT می تواند برای ارزیابی فعالیت ضد باکتریایی یا ضد قارچی ترکیبات یا عصاره ها استفاده شود.
4. پايش پاسخهاي سلولي: از اين آزمايش مي توان براي پايش تغييرات در پاسخ هاي سلولي مانند تغييرات متابوليسم سلولي يا مسيرهاي پيام دهي در پاسخ به محرك هاي مختلف استفاده كرد.
پروتکل تست MTT معمولاً شامل مراحل زیر است:
1. کشت سلولی: سلول ها را در محیط مناسب کشت داده و روی صفحه 96 چاهی قرار می دهند.
2. درمان: سلول ها با مواد مختلفی مانند ترکیبات سمی یا عوامل بیولوژیکی درمان می شوند.
3. افزودن MTT: معرف MTT به سلول ها اضافه می شود و برای یک دوره خاص انکوبه می شود.
4. تشکیل فورمازان: سلول های زنده معرف MTT را به محصول نامحلول فرمازان کاهش می دهند.
5. استخراج با حلال: محصول Formazan در یک حلال آلی مانند DMSO حل می شود.
6. اندازه گیری اسپکتروفتومتری: جذب محلول فورمازان در طول موج خاصی (معمولاً 570 نانومتر) با استفاده از اسپکتروفتومتر اندازه گیری می شود.
مقادیر جذب حاصل برای محاسبه درصد سلول‌های زنده استفاده می‌شود، که سپس با مقادیر کنترل مقایسه می‌شود تا تأثیر تیمار بر زنده‌مانی سلول مشخص شود.

شرکت نانوفناورآلاء مجری انواع آزمون های سلولی شامل سمیت، چسبندگی و زیست سازگاری بوده و با ارائه گزارش کامل تصویری و نموداری دارای آنالیز آماری برای استفاده در مقالات، پایان نامه ها و گزارشات، همراه شما در پروژه های تحقیقاتی خواهد بود. شما می توانید برای ثبت آزمون سلولی مورد نظرتان به قسمت خدمات آزمایشگاهی سایت رفته و آزمون مورد نظر خود را انتخاب نمایید.